Сохранение анатомических препаратов по Мельникову-Разведенкову
Для сохранения естественной окраски препаратов применяют классический способ Мельникова-Разведенкова, состоящий в том, что под влиянием фиксатора гемоглобин крови препарата переводится в метгемоглобин грязно-бурого, почти черного цвета; под действием же этилового спирта ректификата метгемоглобин переводится в стойкий катгемоглобин, или нейтральный гематин, обладающий цветом оксигемоглобина, почему препараты кажутся даже более яркими, чем при естественной окраске. Для этой цели Н.Ф. Мельников-Разведенков предложил три жидкости, рецепты которых приводятся ниже.
Препараты, приготовленные таким способом, сохраняются в солевом растворе глицерина. Технически это выполняется следующим образом.
Первая фаза. Препарат фиксируют в первой жидкости до прекращения выделения из него красной крови: вся кровь должна приобрести грязно-бурый цвет. Это занимает, от одного до нескольких дней в зависимости от величины препарата. Объем жидкости должен раз в 5—10 превышать объем органа.
Вторая фаза. После фиксации препарат извлекают, обсушивают полотенцем и погружают в этиловый спирт ректификат, где он остается от нескольких часов до суток в зависимости от объема органа, во всяком случае до приобретения яркой естественной окраски.
Третья фаза. Для постоянного хранения препарат заключают в солевой раствор глицерина.
Приготовленные таким образом препараты сохраняются неопределенно долгое время и остаются пригодными для микроскопического исследования.
Рецепты жидкостей Мельникова-Разведенкова:
I. Формалина 100 мл, Хлористого калия 5 г, Уксуснокислого калия (натрия) 30 г., воды 1000 мл.
II. Чистый этиловый 96° спирт ректификат.
III. Глицерина 600 мл, Уксуснокислого калия (натрия) 400 г, Воды 1000 мл.
Впоследствии было предложено несколько вариантов способа Мельникова-Разведенкова, отличающихся лишь количественным составом третьей жидкости и некоторым качественным составом первой жидкости. Вторая фаза, как и весь принцип, сохраняется полностью во всех вариантах.
Рецепты жидкостей Мельникова-Разведенкова в модификации Кайзерлинга:
I. Формалина 200 мл, Селитры (азотнокислого калия) 15 г, Уксуснокислого калия (натрия) 30 г, Воды 1000 мл.
П. Спирт.
III. Глицерина 200—350 мл, Уксуснокислого калия 200—800 г, Воды 1000 мл.
Рецепты жидкостей Мельникова-Разведенкова в модификации Пика:
I. Формалина 50 г, Карлсбадской соли искусственной 50 г., Воды 1000 мл.
II. Спирт.
III. Третья жидкость в модификации Кайзерлинга.
При затруднительном получении глицерина можно пользоваться в качестве третьей жидкости раствором Тизенгаузена:
Селитры калийной 10 г, Поваренной соли 200 г., Воды 1000 мл.
Сырцом пользоваться не рекомендуется, так как реакции будут неполные; совершенно недопустимо пользоваться обычным денатурированным спиртом. Можно пользоваться спиртом, денатурированным формалином, но не окрашенным. Раствор нужно фильтровать, так как поваренная соль может содержать грязь.